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上海紀寧實業有限公司 >>> 技術文獻

做標準曲線樣品檢測需要注意的問題

點擊次數:138 發布時間:2022-08-08

      目前流行的免疫檢測擬合方式是“四參數邏輯擬合",用這種擬合方式往往能夠比較的反映濃度和吸光度的曲線關系,從而進一步比較正確的獲得樣品中待測物質的濃度值。

      關于標準曲線的擬合方式,直線、二次曲線、三次曲線、指數、對數等雖都可用于ELISA試劑盒及其它生物學反應中的曲線擬合,但都只適用于曲線的一部分,有的 適用于前半段,有的適用于后半段,有的適用于中間一段,而ELISA試劑盒曲線則對曲線的全部都有較好的適用性。當然,如果用于定量,還是在中間一段較 好。這些方法雖然沒有一種方法可以通用,但也都可以用。關鍵在于你的標準曲線做到了S形的哪一部分,你想檢測的樣品濃度在曲線的哪一部分。在S曲線的低濃 度部分可以用乘冪方程很好的擬合,ELISA試劑盒中低濃度部分可以用直線方程,中間部分可用對數方程,而中后段可用四參數。
      其實,在一個長的區間內,應該都能擬合得較為理想。但并不是說它就是的。事實上不僅是ELISA試劑盒,其它很多生物學反應都是S形曲 線,也都可以用ELISA試劑盒曲線擬合。但建模型是一回事,而用它來定量是另一回事。如果用來定量,S形曲線的中間段(較陡處)是比較好的,而兩端的平 坦部分計算誤差會大,有時甚至會很大。

 
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